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關(guān)于貯藏期間干豆腐微生物指標(biāo)和感官品質(zhì)變化規(guī)律的探索

作者:張毅

     干豆腐在長(zhǎng)時(shí)間放置,微生物大量滋長(zhǎng),除了會(huì)影響其衛(wèi)生質(zhì)量和質(zhì)構(gòu)性質(zhì),還會(huì)產(chǎn)生令人不愉快的氣味,因此試驗(yàn)選用電子鼻對(duì)空白干豆腐和脈沖強(qiáng)光照射處理的干豆腐在貯藏期間的氣味進(jìn)行測(cè)定,以此來(lái)探究脈沖強(qiáng)光是否能夠有效殺滅干豆腐表面的微生物,達(dá)到延長(zhǎng)其貨架期的目的。

1  材料與方法

1.1材料與試劑

    于豆腐:市售,試驗(yàn)當(dāng)天購(gòu)買,帶回實(shí)驗(yàn)室后立即放入4℃冰箱內(nèi)冷藏以備后續(xù)試驗(yàn)使用;平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基( PCA):北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司;月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯( LST):北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司;煌綠乳糖膽鹽肉湯( BGLB):北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司。

1.2儀器與設(shè)備

  AR224CN電子天平:奧豪斯儀器(上海)有限公司;YXQ-LS-75S11立式全自動(dòng)壓力滅菌鍋:北京科創(chuàng)百萬(wàn)科技發(fā)展有限公司;DHG-9055A電熱鼓風(fēng)干燥箱:上海一恒科學(xué)儀器有限公司;HH-6數(shù)顯恒溫水浴鍋:金壇市鑫鑫實(shí)驗(yàn)儀器廠;LA50-800H脈沖強(qiáng)光表面殺菌實(shí)驗(yàn)柜:寧波中物光電殺菌技術(shù)有限公司;SW-CJ-2FD潔凈工作臺(tái):蘇凈集團(tuán)蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司;LRH-150生化培養(yǎng)箱:上海一恒科學(xué)儀器有限公司;PEN3便攜式電子鼻:德國(guó)Airsense

公司。

1.3試驗(yàn)條件

1.3.1溶液與培養(yǎng)基的配制

    按照食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 4789.2-2010“食品微生物學(xué)檢驗(yàn):菌落總數(shù)測(cè)定”和GB 4789.3-2010“食品微生物學(xué)檢驗(yàn):大腸菌群計(jì)數(shù)”進(jìn)行試驗(yàn)所需的溶液及培養(yǎng)基的配制。

1.3.2試驗(yàn)樣品預(yù)處理

    從冰箱取出當(dāng)天購(gòu)買的干豆腐,分成兩份,其中一份樣品經(jīng)脈沖強(qiáng)光照射處理,滅菌條件設(shè)定:能量為300 J,照射距離為10 cm,照射時(shí)間為16 s。另一份樣品不做任何處理,作為空白對(duì)照組。兩份樣品分別為100 g/袋,立即裝入聚乙烯袋內(nèi)并進(jìn)行普通熱封包裝。然后貯藏于4℃冰箱中,在接下來(lái)的8d里,每天取出作為對(duì)照的兩組樣品進(jìn)行微生物指標(biāo)和感官品質(zhì)的測(cè)定。

1.3.3微生物的培養(yǎng)與測(cè)定

    菌落總數(shù)的培養(yǎng)與測(cè)定根據(jù)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 4789.2-2010“食品微生物學(xué)檢驗(yàn):菌落總數(shù)測(cè)定”進(jìn)行。

    大腸菌群的培養(yǎng)與測(cè)定根據(jù)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB4789.3-2010“食品微生物學(xué)檢驗(yàn):大腸菌群計(jì)數(shù)”第一法:大腸菌群最可能數(shù)( MPN)計(jì)數(shù)法進(jìn)行。

1.3.4滅菌率的計(jì)算

  殺菌效果用滅菌率表示,計(jì)算公式為:

  滅菌率=(N-No)/Ⅳ×100%   (1)

  式中:N一滅菌前的菌落總數(shù)或大腸菌群最可能數(shù);N0一滅菌后的菌落總數(shù)或大腸菌群最可能數(shù)。

1.3.5  電子鼻檢測(cè)

    取5g干豆腐于40 mL頂空瓶?jī)?nèi),密封30 min,采用頂空抽樣的方法用電子鼻進(jìn)行檢測(cè)。每個(gè)樣品檢測(cè)3個(gè)平行。電子鼻參數(shù)的設(shè)定:傳感器清洗時(shí)間為100s;調(diào)零時(shí)間為10 s;進(jìn)樣準(zhǔn)備時(shí)間為Ss;樣品采集時(shí)間為100 s;進(jìn)樣流量為350 mL/min。

  數(shù)據(jù)處理方法:使用PEN3電子鼻自帶軟件中的線性判別法( Linear Discriminant Analysis,  LDA)和負(fù)荷加載分析法( Loadings)對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理。

2結(jié)果與分析

2.1貯藏期間干豆腐表面微生物的變化

  食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 2711-2003“非發(fā)酵性豆制品和面筋衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)”規(guī)定菌落總數(shù)≤los CFU/g,大腸菌群≤150 MPN/100 g,以此為標(biāo)準(zhǔn)來(lái)衡量貯藏期間干豆腐的衛(wèi)生狀況。干豆腐表面微生物在貯藏期間的變化情況見表1。試驗(yàn)結(jié)果表明,未經(jīng)脈沖強(qiáng)光滅菌照射處理的干豆腐在貯藏第1天菌落總數(shù)和大腸菌群就超過(guò)了食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的數(shù)值。經(jīng)過(guò)脈沖強(qiáng)

光能量300 J,照射距離10 cm和照射時(shí)間16 s處理的干豆腐在貯藏第4天菌落總數(shù)開始大于105 CFU/g,大腸菌群從第5天開始超過(guò)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。

2.2貯藏期間干豆腐氣味的變化

    PEN3電子鼻系統(tǒng)是一種通過(guò)模擬生物的嗅覺來(lái)進(jìn)行識(shí)別、分析和檢測(cè)揮發(fā)性物質(zhì)的儀器,它由氣味取樣系統(tǒng)、氣體傳感器陣列和信號(hào)處理系統(tǒng)三部分組成。PEN3電子鼻是由10個(gè)傳感器單元組成的傳感器陣列,每個(gè)傳感器單元都有對(duì)應(yīng)的敏感氣體,這些傳感器單元及其屬性描述如下:

    ( 1) WIC-芳香成分;(2) W5S-氮氧化合物;( 3) W3C-氨水,芳香成分;(4) W6S-氫氣;(5)

W5C-烷烴,芳香成分;(6) WIS-甲烷;(7) WIW-硫化物;( 8) W2S-乙醇;(9) W2W-芳香成分,有機(jī)硫化物;( 10) W3S-烷烴。

圖1為典型樣品檢測(cè)過(guò)程中,電子鼻10個(gè)傳感器信號(hào)響應(yīng)曲線,曲線代表干豆腐揮發(fā)性物質(zhì)通過(guò)傳感器時(shí),其響應(yīng)值(相對(duì)電阻率G/G0)隨時(shí)間的變化情況,每條曲線代表1根傳感器。從圖可以看出,隨著干豆腐揮發(fā)性物質(zhì)在傳感器表面的富集,在24 s內(nèi)10個(gè)傳感器信號(hào)值均出現(xiàn)峰值,隨后逐漸趨于平緩,最終達(dá)到相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)。與其他傳感器相比,傳感器2、7、9具有更高的相對(duì)電阻率值。由此可以看出電子鼻對(duì)于豆腐揮發(fā)性成分的響應(yīng)很明顯,并且每一個(gè)傳感器對(duì)干豆腐揮發(fā)性物質(zhì)的響應(yīng)各不相同。

Loadings分析可用來(lái)分析電子鼻各傳感器貢獻(xiàn)率,幫助區(qū)分在當(dāng)前模式下各傳感器的相對(duì)重要性。如果某個(gè)傳感器在坐標(biāo)軸上的位置距原點(diǎn)(0,0)越遠(yuǎn),其負(fù)載參數(shù)值就越大,說(shuō)明該傳感器在識(shí)別時(shí)的貢獻(xiàn)就越大;反之,貢獻(xiàn)率就越小。當(dāng)某個(gè)傳感器在模式識(shí)別中的負(fù)載參數(shù)接近0時(shí),那么該傳感器的識(shí)別能力可以忽略不計(jì);若傳感器的響應(yīng)值很高,則該傳感器就是識(shí)別傳感器。圖2為干豆腐的Loadings傳感器貢獻(xiàn)率分析圖。由圖可知,傳感器2、6、7和8距離原點(diǎn)較遠(yuǎn),響應(yīng)值較大,因此傳感器2、6、7和8在識(shí)別干豆腐時(shí)作用較大。

貯藏期間空白組干豆腐的LDA分析見圖3。對(duì)于空白組干豆腐,每天的區(qū)分非常明顯,判別式1的貢獻(xiàn)為90.13%,判別式2的貢獻(xiàn)為5.91%,總貢獻(xiàn)率達(dá)到96.04%。隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),貯藏后期的干豆腐與新鮮的干豆腐距離越來(lái)越遠(yuǎn)。從圖中可以看出,第0~第4天的干豆腐和第5~第7天的干豆腐已經(jīng)被分為2個(gè)集團(tuán),分別位于圖的兩側(cè),很明顯的將感官上已經(jīng)發(fā)生很大變化的干豆腐分開了。LDA分析方法注重氣味速率變化分析(圖中各類中心點(diǎn)之間的距離),所以從圖中可以看出空白組干豆腐氣味的變化速率。從第0~第2天速率變化較小,但到第3和第4天的過(guò)程中速率變化明顯變大,由于第5~第7天的干豆腐氣味變得不能接受,所以和其他貯藏期干豆腐明顯分離。

    圖4顯示的是貯藏期間試驗(yàn)組干豆腐的LDA分析。采用此法可以區(qū)分貯存期內(nèi)的干豆腐樣品,不同貯藏期的干豆腐位于不同的坐標(biāo)區(qū)域內(nèi)。從圖可以看出每天的區(qū)分非常明顯,判別式1貢獻(xiàn)89.82%,判別式2貢獻(xiàn)8.34%,總貢獻(xiàn)率達(dá)到98.16%。經(jīng)過(guò)脈沖強(qiáng)光處理過(guò)的干豆腐在貯藏的7d里氣味并沒有發(fā)生太大的變化。

3結(jié)論

    在貯藏第1天發(fā)現(xiàn)未滅菌組干豆腐的菌落總數(shù)和大腸菌群均不符合食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。經(jīng)過(guò)脈沖強(qiáng)光能量300 J,照射距離10 cm和照射時(shí)間為16 s滅菌后,干豆腐的菌落總數(shù)在貯藏第4天超過(guò)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的數(shù)值105 CFU/g,大腸菌群從第5天開始大于150MPN/100 g。經(jīng)過(guò)脈沖強(qiáng)光滅菌的干豆腐的貯藏時(shí)間比未滅菌的干豆腐多3d。

隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),未滅菌的干豆腐在第5天氣味發(fā)生較大的改變,與前4d差別明顯。而經(jīng)優(yōu)化條件滅菌的干豆腐在貯藏的7d里氣味并沒有發(fā)生太大的變化。綜上所述,脈沖強(qiáng)光可以有效殺滅干豆腐表面的微生物,并且對(duì)干豆腐的氣味沒有太大的影響。

4摘要

利用脈沖強(qiáng)光殺菌技術(shù)對(duì)干豆腐進(jìn)行滅菌處理,試驗(yàn)結(jié)果表面其貯藏時(shí)間比未滅菌空白組干豆腐多3 d。經(jīng)過(guò)電子鼻測(cè)試表明,未滅菌干豆腐在貯藏第5天起氣味發(fā)生明顯變化,而經(jīng)過(guò)脈沖強(qiáng)光滅菌的干豆腐在貯藏7 d內(nèi)氣味并沒有發(fā)生明顯變化。說(shuō)明脈沖強(qiáng)光殺菌技術(shù)可以有效殺滅干豆腐表面的微生物,延長(zhǎng)其貨架期并且不影響其感官品質(zhì)。

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